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  酶联免疫吸附测定法 (enzyme-linked immunosorbent assay),简称 ELISA,是用于检测微量物质的固相免疫测定方法,是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。自1971年问世以来,发展十分迅速,已成为是免疫学和分子生物学中普遍的使用的实验室技术。

  将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,用酶标记抗原或抗体孵育,使抗原抗体在固相表面结合,通过加底物发光显色检测液体中未知抗体或抗原的方法。

  在具体的实验中,由于的不同反应物具有不一样的特性,具体的检测的新方法也有很多种。例如:直接法、间接法、夹心法、竞争法、捕获法等。

  将抗原固定在载体上,然后加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,该方法操作简单便捷,无需二抗可避免交叉反应,缺点是费用较高,并且无法检测抗体数量。

  将抗原固定与载体上,采用抗原连接被检测抗体,再连接酶标抗体的方式来进行检测,虽然可以做不同的检测分析,但该方法只能抗体的测定,并且易发生交叉反应。

  该方法中抗原被捕捉抗体和酶标抗体结合与不同位点,捕捉抗体固定于载体上,酶标抗体通过结合抗原进行测定,该方法中使用的抗体需为单抗,并且与抗原有不同的结合位点,如此才可避免交叉反应和竞争性反应。因此夹心发具有高灵敏度,高专一性的特点,但只适合有多个结合位点的抗原。

  该方法中将抗原固定于载体,检测样本中的抗体与抗原结合后,需要用酶标抗原进行后续的结合,可拿来检测样本中的抗体。双抗原夹心法的重点是酶标抗原的制备。

  首先,将抗原或抗体吸附到固相载体上;加入待检样品以及后续试剂;温育;洗涤去掉游离未结合的反应物;加入酶检测底物以及最后的结果的判读。

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  云克隆凭借着深厚的技术积累和庞大的引物、cDNA、质粒、杂交瘤细胞“种子库”和检测试剂半成品库库存,能做到约11,000种蛋白、19,000种抗体以及7,000种检测试剂盒立等可取。其中蛋白产品有天然蛋白、重组蛋白、合成多肽和小分子偶联蛋白。抗体产品有单克隆抗体与多克隆抗体,部分抗体采用HRP、FITC或生物素标记成为标记抗体。制剂中心负责检测试剂盒的研制,主要是ELISA和CLIA试剂盒。检验测试中心负责所有蛋白、抗体以及检测试剂盒产品的检测及质量控制,实行三级质量控制,包括原料检测、半成品检测及成品检测。