八爪鱼状DNA纳米结构和氧化石墨烯增强乙肝病毒DNA检测荧光各异性
1）构建了一种根据八爪鱼状的DNA纳米结构(ODN)和氧化石墨烯（GO）一起增强荧光各向异性的新战略。
（2）运用ODN的刚性结构来间隔染料和GO的间隔，防止GO猝灭荧光，提高了检测的准确性。此外，因为ODN的体积大，靶物竞赛的空间位阻下降，提高了反响的活络度。
（3）一起ODN运用六个poly-A20牢牢吸附在GO上，提高了该办法在杂乱样品检测中的抗干扰才能。
荧光各向异性（FA）是一种根据分子旋转的生物传感办法。它是一种比率测量法，反映了荧光基团的固有特性，如尺度、旋转速度和寿数。与其他荧光剖析办法比较，荧光各向异性法对强度动摇和光漂白的敏感性较低，已大范围的应用于蛋白质、金属离子、小分子、核酸分子等多种靶标的检测，一起它也被用于探求物质之间的相互作用。但是，大多数办法遭到方针分子质量小的约束，导致检测活络度有限。因而，挑选正真合适的FA增强资料，构建具有较高活络度的FA检测的新办法是非常有意义的。
在此工作中，作者建立了一种新式的FA扩大战略。该战略以DNA四面体为骨架，将其规划为八爪鱼形状的DNA纳米结构（ODN），并结合氧化石墨烯（GO）一起增强ssDNA的荧光各向异性值(r)，用于活络检测乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）。
如图1所示，作者用4条DNA单链S1、S2、S3和S4自拼装构成ODN。一起，S1的部分序列被规划为捕获DNA (cDNA)，能与探针DNA（pDNA）杂交，其他的DNA经过p-p堆积作用使ODN吸附在GO上。在没有HBV-DNA时，羧基四甲基罗丹明（TAMRA）润饰的pDNA与cDNA经过碱基互补配对杂交。一起，ODN经过6个poly-A20与GO结合，构成ODN-GO复合物。因而，TAMRA的旋转遭到较大质量的GO和ODN的一起约束，得到较高的r值。参加HBV-DNA后，HBV-DNA经过立足点介导的链交流反响与pDNA杂交构成双链(dsDNA)结构，脱离ODN和GO外表。此刻，因为dsDNA的质量较小，在溶液中旋转速度快，TAMRA的FA值较低。因而，经过显着下降的FA值可完成HBV-DNA的活络检测。
首要，用12%聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）证明了ODN的构成。此外，运用原子力显微镜对GO和ODN-GO进行了表征，证明了ODN-GO的成功构建。
接着作者验证了该办法的可行性，证明了只能当GO和ODN一起存在时，Δr/r0最大。ODN-GO增强的Δr/r0值比独自运用ssDNA约高2.5倍，比独自运用GO约高2倍。作者也证明ODN具有较强的刚性结构和较高的增强FA的才能。
最终，在最佳的试验条件下，Δr/r0与HBV-DNA在1 nM-50 nM浓度范围内呈杰出的线），其间c为HBV-DNA浓度（单位为nmol/L）。检测限（LOD）为330 pM (3σ/k)。相较于只要GO增强和只要ODN增强的FA战略，作者提出的办法具有更高的活络度。